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高压灭菌器使用注意事项

发布日期:2022-01-21 10:28   来源:未知   阅读:
 

  通常,培养茫脱基使用说明上灭菌温度是一个固定值,如:121℃,20min,其实121℃只是灭菌温度的下限,实际的灭菌温度在121℃~124℃(或123℃)之持强列间波动。如果是自木心措动控温型灭菌锅,设定好灭菌温度下限为121℃后,当温度升到124℃(或123℃)时,自动断电停止加热,当温度降到121℃时,自动开始加热;如果是手动控温型灭菌锅,当温度升到124℃时,手动切断电源停止加热,当温度降到121℃时,手动接通电源开始加热。

  对于这类灭菌锅必须排尽冷空气,如果不排尽冷空气,冷空气热膨胀后对压力锅的工作压力有影响,造成压力和温度不能一一对应,显示的温度比锅内的实际工作温度高,灭菌锅的工作温度不能达到设定的杀菌温度,会影响灭菌效果。

  自动控温型灭菌锅通过热敏电极监测锅内温度变化,显示屏上显示的温度是锅内真实的工作温度,在冷空气没有排尽的情况下,也能够保证灭菌的温度要求。由于饱和水蒸汽的灭菌效果最好,所以在使用自动控温型灭菌锅时,也应该排放冷空气,提高灭菌效果。

  ②加热升温过程中,看压力表指针的上升状况是否有受阻情况发生,没有受阻,可正常使用。

  ③在排除冷空气的前提下, 观察显示屏上的温度和压力表指示温度的差,通常情况下,压力表上的温度略高于显示屏上的温度,此压力差如果不超过3℃,可正常使用。

  水温应尽量低。温度不超过15℃。水的硬度值在0.7~2.0mmoL /L之间。

  灭菌锅应使用干燥程度不小于0.9的饱和蒸汽,即蒸汽含水量不超过10%,金属负载状态下,干燥程度不小于0.95,以保持温度与压力符合线性关系。

  在对液态物质进行灭菌时,当灭菌结束注意卸压不能过快,尽量将排气阀关小,保持自然降压,保持系统原有的平衡,以防产生液体减少或喷溅现象。

  提醒:高压灭菌锅属于高压设备,操作人员需在当地特种设备监督部门考核取证。压力阀也要定期送专业部门检验。平日按照设备作业指导书规定要求使用和维护保养并做好记录。

  在密闭的灭菌器内蒸气不外溢,压力不断上升,使水受热达到沸点,灭菌器内温度随之升高;在0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃。在此温度下,可以很快杀死各种细菌及高度耐热的芽孢。电磁阀控制的灭菌器(全自动型)逐次排放掉空气,剩余全是蒸气,灭菌进而彻底。

  关闭放气阀,通电待压力上升到0.05MPa时,打开放气阀放出空气,待压力表指针归零后再关闭放气阀。再通电后,压力表上升达到0.1MPa时开始计时,维持压力0.1~0.15MPa,20min。到达保压时间后切断电源,在压力降到0.5MPa缓慢放出蒸气,注意不要使压力降低太快,以致引起激烈的减压沸腾,使容器中的液体四溢。当压力降到零后开盖,取出培养基,摆在平台上以待冷凝。

  对高压灭菌后不变质的物品,如无菌水、栽培介质、接种用具,可以延长灭菌时间或提高压力。培养基要严格遵守保压时间,既要保压彻底,又要防止培养基中的成分变质或效力降低,不可随意延长时间。对于一些布制品,如实验服、口罩等也可用高压灭菌。洗净晾干后用耐高压容器装好,高压灭菌20~30min。

  高压灭菌后的培养基,其pH值会下降0.2~0.3个单位。灭菌后培养基pH值的变化方向和幅度受多种因素影响。培养基中成分单一、含有高或较高浓度物质时,高压灭菌后的pH值变化幅度较大。高压灭菌常会使培养基中的蔗糖水分解为单糖,从而改变培养基的渗透压。在8%-20%蔗糖范围内,高压灭菌后的培养基约升高0.43倍。培养基中的铁在高压灭菌时会催化蔗糖水解,会使15%~25%的蔗糖水分解为葡萄糖和果糖。培养基值小于5.5,其水解量更多,培养基中添加0.1%活性炭时,高压下蔗糖水解大大增强,添加1%活性炭,蔗糖水解率可达5%。

  如:避免使用果糖和山梨醇而用甘露醇,以IBA代替IAA,控制活性炭的用量(在0.1%以下),注意pH值对高压灭菌下培养基中成分的影响等。

  配制培养基时应注意成分的适当分组与加入的顺序。如将磷、钙和铁放在最后加入。

  如:高压灭菌后的pH值常由5.80升高至6.48。而96h后又回降至5.8左右,在实验中可以根据这一规律加以应用。

  灭菌器是一种能杀灭或清除传播媒介上一切微生物,包括细菌芽孢和非致病微生物的仪器。通常有湿热消毒灭菌、干热消毒灭菌、化学消毒灭菌三种方式。

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  热力灭菌法是利用高温使菌体蛋白质凝固或变性,酶失去活性,代谢发生障碍,致细菌死亡。热力灭菌法包括湿热灭菌法和干热灭菌法。

  湿热可使菌体蛋白凝固、变形;干热可使菌体蛋白氧化、变性、碳化和使电解质浓缩引起细胞的死亡。热力灭菌方便、效果好、无毒,是多数消毒供应中心使用的主要灭菌方法。

  压力蒸汽灭菌采用湿热灭菌法,在同样温度下,湿热的杀菌效果比干热好,有以下原因:

  蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关,含水量越大,发生凝固所需的温度越低。湿热灭菌时的菌体蛋白质可吸收水分,新疆自治区吐鲁番地区地税系统全面推行网络...,因而比在同一温度的干热空气中更易于凝固。

  湿热灭菌过程中蒸汽放出大量潜热,进一步提高温度。在同一温度下,湿热灭菌所需时间比干热短。

  湿热气体的穿透力比干热气体强,故湿热比干热收效好。高压蒸汽可以杀死一切微生物,甚至包括细菌的芽孢,真菌的孢子等耐高温的个体。灭菌的蒸汽温度随蒸汽压力增加而升高,通过增加蒸汽压力,灭菌时间可被大大缩短。因此它是一种最有效,使用最广泛的灭菌方法。

  低温灭菌方法是利用化学灭菌剂杀灭病原微生物的方法。化学药剂进行灭菌处理时所需温度较低,通常称为低温灭菌方法或化学灭菌方法。低温灭菌使用的化学消毒剂能够杀灭所有微生物,达到灭菌保证水平,这类具有灭菌作用的化学药剂有甲醛、戊二醛、环氧乙烷、过氧乙酸等。化学灭菌用于不能耐受高温、湿热材质类的器械的灭菌。

  常用的低温灭菌方法有过氧化氢等离子低温灭菌、环氧乙烷灭菌、低温甲醛蒸汽灭菌等。

  通过过氧化氢液体弥散变成气体状态后对物品进行灭菌,通过产生的等离子体进行第二阶段灭菌。等离子过程还可加快、彻底分解过氧化氢气体在器械和包装材料上的残留。等离子体灭菌法的特点为作用迅速、杀菌可靠、作用温度低、清洁而无毒性残留。适用于内镜、不耐热器材、各种金属器械、玻璃等物品;能吸收水分和气体。

  环氧乙烷是一种无色气体,气味与相似,低浓度时无味。其气体穿透力强,可穿透玻璃纸、聚乙烯或聚氯乙烯薄膜等,对微生物的蛋白质、DNA、RNA产生非特异性的烷基化作用,使其失去新陈代谢的基本反应基而被杀灭,杀菌力强,杀面广,灭菌效果可靠,对灭菌物品损害较小等。

  在一定压力下产生的蒸汽湿度高、穿透力强,能够迅速有效地杀灭微生物,是器械灭菌的主要方法之一。其特点是杀菌可靠、经济、快速、灭菌效果好。

  压力容器:包括灭菌室、夹套、门和其他与灭菌室永久相连接的部件。采用不锈钢材料,并有保温材料层。

  夹套:环绕焊接在灭菌室外表面的不锈钢结构,实现机械加固,灭菌室温度控制的作用。

  灭菌室排放管路:连接灭菌室与排放管路,是灭菌室内气体及冷凝水排出外部的通道。

  回气管路:将灭菌室和大气相连,当内室干燥时形成真空,通过回气管路,使内室与外界大气压平衡。

  干热灭菌器是由双层铁板制成的方形金属箱,外壁内层装有隔热的石棉板。箱底下放置大型火炉,或在箱壁中装置电热线圈。内壁上有数个孔,供流通空气用。箱前有铁门及玻璃门,箱内有金属箱板架数层。电热烤箱的前下方装有温度调节器,可以保持所需的温度。

  灭菌效果监测是评价其灭菌设备运转是否正常、灭菌药剂是否有效、灭菌方法是否合理、灭菌效果是否达标的主要手段。主要的灭菌效果监测方法包括:物理监测法、化学监测法、生物监测法及化学消毒剂的监测等 。

  加水至外筒内,被灭菌物品放入内筒。盖上灭菌器盖,拧紧螺旋使之密闭。灭菌器下用煤气或电炉等加热,同时打开排气阀门,排净其中冷空气,否则压力表上所示压力并非全部是蒸汽压力,灭菌将不完全。

  待冷空气全部排出后(即水蒸气从排气阀中连续排出时),关闭排气阀。继续加热,待压力表渐渐升至所需压力时(一般是101.53 kPa,即15磅/英寸2,温度为121.3℃),调整炉火,保持压力和温度(注意压力不要过大,以免发生意外),维持15~30 min。灭菌时间到达后,停止加热,待压力降至零时,慢慢打开排气阀,排除余气,开盖取物。切不可在压力尚未降低为零时突然打开排气阀门,以免灭菌器中液体喷出。

  将培养皿、吸管、试管等玻璃器材包装后放入箱内,闭门加热。当温度上升至160~170℃时,保持温度2 h,到达时间后,停止加热,待温度自然下降至40℃以下,方可开门取物,否则冷空气突然进入,易引起玻璃炸裂;且热空气外溢,往往会灼伤取物者的皮肤。一般吸管、试管、培养皿、凡士林、液体石蜡等均可用本法灭菌。